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常用生理鹽溶液的配制

附錄一   常用生理鹽溶液的配制
 

       進(jìn)行在體或離體器官及組織實(shí)驗時(shí),應盡可能使標本處于近似在體內的環(huán)境以保證其正常的生命及其功能活動(dòng)。其需要具備以下條件:

        (1)滲透壓與組織液相同;

       (2)有維持組織器官正常機能所必需的比例適宜的各種離子;

       (3)酸堿度與血漿相同并具有緩沖能力;

       (4)營(yíng)養物質(zhì)、氧及溫度與組織液相同。這類(lèi)液體稱(chēng)為生理鹽溶液。

 
一、常用生理鹽溶液的配制
       動(dòng)物種類(lèi)不同其代替液的組成各異,滲透壓也不一樣,因此,作為代替液的生理鹽溶液在組成成分上也有所區別。如:兩棲類(lèi)動(dòng)物體液的滲透壓相當于0.65%NaCI溶液;溫血動(dòng)物體液的滲透壓則相當于0.9%NaCI溶液;海生動(dòng)物體液的滲透壓約相當于3%NaCI溶液。
       不同動(dòng)物的組織器官對氧和營(yíng)養物質(zhì)等內環(huán)境成分的需求有一定差異。兩棲類(lèi)動(dòng)物組織器官對氧和營(yíng)養物質(zhì)需要程度低于溫血動(dòng)物。各種實(shí)驗的目的不同生理鹽溶液的組成成分可作種種變動(dòng)。常用的有:生理鹽水、任氏液、樂(lè )氏液、臺氏液等。
       (一) 常用生理鹽溶液及其成分
       (二)利用原液配制生理鹽溶液
 
二、常用生理鹽溶液的用途
        一般實(shí)驗中常用的鹽溶液有生理鹽水即與血清等滲氯化鈉溶液,在冷血動(dòng)物應用0.6%~0.65%,哺乳動(dòng)物應用0.85%~0.9%。任氏液(Ringer)主要用于蛙心灌注及其他冷血動(dòng)物實(shí)驗;樂(lè )氏液(Locke)用于哺乳類(lèi)動(dòng)物心臟、子宮及其離體臟器實(shí)驗,灌注時(shí)須于用前通入氧氣15min。低鈣樂(lè )氏液(含無(wú)水CaCl20.05g)用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。臺氏液(Tyrode)用于哺乳動(dòng)物離體小腸實(shí)驗。
        近年來(lái)對組織提取和細胞培養常需用胰蛋白酶(trypsin)或EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid, Versene)對組織或細胞進(jìn)行處理。Ca2+或Mg2+對此有妨礙作用,故在此情況,常用不含Ca2+及Mg2+的生理鹽溶液。用胰蛋白酶處理的組織或細胞,常用溶液作為營(yíng)養液。Moscona溶液成分為:
NaCl            8.00 g
KCl             0.20 g
NaH2PO4         0.005 g
NaHCO3          1.00 g
Glucose         2.00 g
加蒸餾水到       1000 ml
需用處理的組織或細胞,所用營(yíng)養的成分則為:
Na-Versenate        0.2 g
NaCl            8.0 g         
KCl             0.2 g
Na2HPO4       1.15 g
KH2PO4          0.2 g
Glucose         0.2 g
加蒸餾水到       1000 ml
 
三、生理鹽溶液配制注意事項
        配制生理鹽溶液時(shí)要注意各種離子的相互作用。一般應在實(shí)驗前配制,并不宜放置過(guò)久,以免發(fā)生污染或某些成分發(fā)生化學(xué)變化而影響實(shí)驗結果,或者先將溶液的各種成分分別配制成一定濃度的基礎溶液備用,用時(shí)按比例取基礎液配制。在配制各種生理鹽溶液時(shí)應注意以下幾點(diǎn):
       1. 因生理鹽溶液中的磷酸根和碳酸根負離子易與鈣離子發(fā)生反應,生成不溶性的白色磷酸鈣或碳酸鈣沉淀。所以,在配制生理鹽溶液時(shí),先將其他離子原液混合并加入蒸餾水,最后再將溶解的氯化鈣溶液一邊攪拌一邊緩緩加入,以防鈣鹽沉淀生成。
       2. 葡萄糖應在臨用時(shí)加入,加入葡萄糖的生理鹽溶液不能久置,以免發(fā)生細菌污染出現混濁。
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