凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)（鹽析得到的IgG）中均含有硫酸銨等鹽類(lèi)，這類(lèi)將影響以后的純化，所以純化前均應除去，此過(guò)程稱(chēng)為“脫鹽”（desalthing）。脫鹽常用透析法和凝膠過(guò)濾法，這兩種方法各有利弊。前者的優(yōu)點(diǎn)是透析后析品終體積較小，但所需時(shí)間較長(cháng)，且鹽不易除盡；凝膠過(guò)濾法則能將鹽除盡，所需時(shí)間也短，但其凝膠過(guò)濾后樣品體積較大。所以，要根據具體情況選擇使用。前實(shí)驗中樣品體積較小，凝膠達濾后樣品體積不會(huì )太增加，所以選用凝膠過(guò)濾法。

   （6）黑、白比色磁盤(pán)。

   （1）取層析柱1支（1.5cm×20cm），垂直固定在支架上，關(guān)閉下端出口。將已經(jīng)溶脹好的Sephadex G-25中的水傾倒出去，加入2倍體積的0.0175mol/L，pH6.7磷酸鹽緩沖液，并攪拌成懸浮液，然后灌注入柱，打開(kāi)柱的下端出口，繼續加入攪勻的Sephadex G-25，使凝膠自然沉降高度到17cm左右，關(guān)閉出口。待凝膠柱形成后，在洗脫瓶中加入0.0175mol/L，pH6.7磷酸鹽緩沖液以3倍柱體積的磷酸鹽緩沖流過(guò)凝膠柱，以平衡凝膠。

   （2）凝膠平衡后，用皮頭滴管除去凝膠柱面的溶液，將鹽析所得全部IgG樣品加到凝膠柱表面，打開(kāi)柱下口，控制流速讓IgG樣品溶液慢慢浸入凝膠內。凝膠柱面上加一層的0.0175mol/L，pH6.7磷酸鹽緩沖液，并用此緩沖液洗脫，控制流速為0.5ml/min左右。用試管收集洗脫液，每管10滴。

   （3）在開(kāi)始收集洗脫液的同時(shí)檢查蛋白質(zhì)是否已開(kāi)始流出。為此，由每支收集管中取出1滴溶液置于黑色比色磁盤(pán)中，加入1滴20%磺基水楊酸，若呈現白色絮狀沉淀即證明已有蛋白質(zhì)出現，直到檢查不出白色沉淀時(shí)，停止收集洗脫液。