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細胞瞬時(shí)轉染

發(fā)布人：admin 瀏覽次數：1830 發(fā)布時(shí)間：2017-10-19

原理：
       通過(guò) 脂質(zhì) 體介導轉染法及電穿孔等基因轉染技術(shù)，將靶基因導入細胞，一般在轉染后48小時(shí)左右，靶基因即可在細胞內表達。根據不同的實(shí)驗目的，48小時(shí)后即可進(jìn)行靶 基因表達 的檢測等實(shí)驗。


應用：

       觀(guān)察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能（短時(shí)間即可進(jìn)行觀(guān)察，但效應會(huì )很快丟失）。


一般流程：

       1）細胞接種：轉染實(shí)驗前天接種細胞，各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長(cháng)率和細胞形狀而定。進(jìn)行轉染當天細胞密度應達到60%~80%覆蓋。
       2）細胞轉染（脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等）
       3）48小時(shí)以后鑒定目的基因的表達情況。


前期準備：

       構建好的外源基因載體，或目的基因基本信息。
       待轉染的細胞系（1×106個(gè)細胞，可傳代，倍增時(shí)間小于48小時(shí)）以及 細胞培養 條件的說(shuō)明。
       若需要檢測靶基因的表達，請提供相應抗體 。


結果呈現：

       構建好的瞬時(shí)轉染細胞及相關(guān)的外源基因表達分析。


       （本文轉載丁香通）

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