10電泳:將載片移入電泳槽,調節電泳槽兩端電壓為20V,200mA,4攝氏度,電泳20min。
11中和:將載玻片移入新的裂解槽,注入中和液,浸沒(méi)玻片,4攝氏度中和三次,每次5min.
12 梯度脫水:將載玻片移入新的裂解槽,進(jìn)行梯度乙醇脫水(80%、100%),每個(gè)梯度脫水5min。
13 待載玻片室溫干燥后,每片滴加PI(20ug/ml)20ul,再覆蓋蓋玻片,避光染色20min,注意蓋片下不要產(chǎn)生氣泡。
14 熒光顯微鏡下觀(guān)察、采圖,每份樣品隨機拍攝50個(gè)DNA受損細胞圖像,還可用CASP彗星專(zhuān)用數據分析軟件進(jìn)行數據分析。