實(shí)驗原理
在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。AnnexinV是一種分子量為35~36 kD的Ca2+依賴(lài)性磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過(guò)細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。 碘化丙啶(PI)是一種核酸染料,它不能透過(guò)完整的細胞膜,但對凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI能夠透過(guò)細胞膜而使細胞核染紅。因此將AnnexinV與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細胞區分開(kāi)來(lái)。