目的：構建特異性抑制大鼠Raf-1基因的重組腺病毒載體，體外轉導大鼠心肌細胞進(jìn)行功能鑒定。

　　方法：合成大鼠Raf-1的靶序列和陰性對照序列，將退火后的DNA雙鏈定向克隆到穿梭質(zhì)粒pAdTrackCMV中，得到pAdTrack-siRaf-1質(zhì)粒。 pAdEasy-1 骨架質(zhì)粒是同源的。重組pAd-siRaf-1質(zhì)粒，轉染HEK293細胞，包裝得到pAd-siRaf-1腺病毒顆粒，感染原代培養的心肌細胞。蛋白質(zhì)印跡用于檢測針對af 的 siRNA。 .-1、用于測量NF-κB基因抑制效率、3H-亮氨酸（[3H]-leu）攝取率的液體閃爍計數器，用于測量細胞表面積的HJ2000圖像分析系統。

　　結果：重組腺病毒載體被正確消化鑒定，制備的病毒感染效率高。攜帶af-1 的病毒顆?？捎行б种芶f-1 表達、細胞表面積和 AngII 誘導的 [3H] 蛋白水平心肌細胞。 ] -Leu 增加和下調af-1 和F-κB 的表達。

　　結論：pAd-siRaf-1重組腺病毒載體構建成功，包裝在HEK293細胞重組腺病毒中。轉染心肌細胞后，可有效抑制Raf-1和NF-κB的表達，抑制心肌誘導。由于A(yíng)ngⅡ細胞肥大。