目的: 探討人工重組A 型肉毒素重鏈對在體大鼠脊髓損傷局部生長(cháng)相關(guān)蛋白表達的影響, 為闡明BoNT/ A 重鏈促神經(jīng)突起再生機制提供依據。
方法: 建立大鼠單側腰段脊髓橫斷損傷模型并局部及鞘內給予BoNT/ A 重鏈;對用藥后不同時(shí)間局部骨髓組織進(jìn)行雙向電泳檢測總體蛋白表達;選擇生長(cháng)相關(guān)蛋白-43(GAP-43)和頸上神經(jīng)節蛋白10(SCG 10)進(jìn)行蛋白印跡和免疫熒光檢測以觀(guān)察二者在BoNT/ A 重鏈影響下的表達及分布。
結果: (1)單側腰髓離斷損傷模型動(dòng)物呈現明顯單側運動(dòng)及感覺(jué)功能障礙;(2)脊髓損傷后給予BoNT/A 重鏈可影響損傷局部蛋白表達譜變化:BoNT/ A 重鏈可引起損傷局部蛋白點(diǎn)群在變化的基礎上逆轉或表達進(jìn)一步增加,尤以MW 位于35 ~45 kDa 及18 ~25 kDa。等電點(diǎn)在5 ~7 范圍的蛋白點(diǎn)表現明顯;(3)蛋白印跡和免疫熒光染色結果提示: BoNT/ A 重鏈可促進(jìn)p-GAP 43 和SCG 10 的表達(P< 0.05),且p-GAP 43 及SCG 10 主要以損傷周?chē)毎?yáng)性明顯,胞漿及突起皆呈陽(yáng)性。
結論: 脊髓損傷后給予BoNT/ A 重鏈可促進(jìn)脊髓損傷后選擇性生長(cháng)相關(guān)蛋白p-GAP 43 和SCG 10 的表達。