目的： 采用氧糖剝奪(OGD)致HUVEC 細胞損傷模型,考察三七總皂苷(PNS)及其單體Rg1?Rb1對氧糖剝奪致血管內皮緊密連接損傷的保護作用。

　　方法： HUVEC 細胞接種于Transwell 細胞小室,待細胞融合后,設立實(shí)驗組別:正常對照組?模型組?PNS 10、20、40 mg/ L 組以及Rb1 13.52 mg/ L、Rg1 12.44 mg/ L 組,于缺氧同時(shí)進(jìn)行藥物干預,氧糖剝奪6 h 復氧24 h 后,檢測HUVEC 內皮細胞電阻值以及內皮滲透性的變化;采用激光共聚焦顯微鏡,免疫熒光法檢測HUVEC 細胞ZO-1?claudin-5 蛋白表達的變化。

　　結果： 與正常對照組相比,HUVEC 細胞缺氧6 h 復氧24 h 后內皮細胞間緊密連接電阻顯著(zhù)降低,細胞滲透性顯著(zhù)升高(P < 0.05)。PNS 20、40 mg/ L 組能夠顯著(zhù)抑制模型組緊密連接電阻的降低,抑制HUVEC 細胞滲透性的升高(P < 0.05)。人參皂苷Rb1 能夠顯著(zhù)升高OGD 6 h 復氧24 h 后內皮緊密連接電阻,降低HUVEC 細胞滲透性(P < 0.05)。免疫熒光檢測結果顯示,正常對照組HUVEC 細胞的ZO-1 及claudin-5 蛋白主要分布于細胞膜周?chē)?排列連續,顯示出內皮細胞的典型鋪路石排列。缺氧6 h 復氧24 h 損傷后,模型組細胞邊緣的緊密連接蛋白顯著(zhù)減少,環(huán)形結構斷裂,甚至消失,細胞核內緊密連接蛋白呈增加趨勢。PNS 20、40 mg/ L 及Rb1 13.52 mg/ L 可觀(guān)察到細胞間緊密連接局部恢復,呈鋪路石樣結構。

　　結論： PNS 對缺血致血管內皮細胞間緊密連接損傷有保護作用。