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【動(dòng)物實(shí)驗外包】-針刺對人羊膜間充質(zhì)細胞移植治療去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的協(xié)同效應

  目的:討論針刺結合人羊膜間充質(zhì)細胞移植對去卵巢骨質(zhì)疏松協(xié)同效應研討。

  辦法:選擇雌性未孕的Wistar大鼠45只,完整隨機分組分為假手術(shù)組、模型組及實(shí)驗組(針刺+人羊膜間充質(zhì)細胞移植),每組各15只。各組手術(shù)傷口恢復后,第7天開(kāi)行針刺+尾靜脈注射HAMCs液(假手術(shù)組除外)連續干預12周,于末次干預后24 h,處死大鼠并采集標本。從開(kāi)端干預至處死,每周測定1次各組大鼠的體質(zhì)量,雙能X線(xiàn)吸收骨密度儀分別測定左側股骨中點(diǎn)、遠端和近端骨密度,用原子吸收法測定其骨鈣含量;干預12周后采用ELISA法檢測血清25-羥基維生素D(25-HVD)、I型膠原C端肽(CTX-I)、骨特異性堿性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的表達變化;干預12周后檢測各組大鼠生物力學(xué)性能的變化。干預12周后RT-PCR技術(shù)檢測椎骨中轉化生長(cháng)因子β1(TGF-β1)的基因表達狀況。

  結果:假手術(shù)組大鼠體重逐步增加,契合動(dòng)物自然生長(cháng)規律,模型組于造模后兩個(gè)月開(kāi)端,體重卻明顯高于假手術(shù)組,實(shí)驗組體重漸增,與假手術(shù)組相近。模型組比擬假手術(shù)組的骨密度和骨鈣含量均降低,差別具有統計學(xué)意義(P<0.05),與模型組較,實(shí)驗組的骨密度和骨鈣含量含量均升高,差別具有統計學(xué)意義(P<0.05)。ELISA法顯現,血清25-HVD、CTX-I、BAP、TRAP5b的表達,與假手術(shù)組比擬,模型組顯著(zhù)降低,與模型組比擬,實(shí)驗組顯著(zhù)升高,(P<0.05)。生物法力學(xué)檢測顯現,假手術(shù)組的極限載荷、極限應力和彈性模量比模型組有顯著(zhù)增高(P<0.05),實(shí)驗組的極限載荷和彈性模量比假手術(shù)組有顯著(zhù)增高(P<0.05)。RT-PCR檢測顯現TGF-β1的m-RNA的表達,與假手術(shù)組、模型組比擬,實(shí)驗組明顯上調(P<0.05)。

  結論:針刺結合人羊膜間充質(zhì)細胞(HAMCs)移植具有較好的對去卵巢骨質(zhì)疏松協(xié)同效應,可改善去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用。

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