目的 本研究建立的轉綠色熒光蛋白基因近交系裸小鼠(GFP 裸小鼠)已在示蹤研究膠質(zhì)瘤微環(huán)境方面起了重要作用,但在治療自體顱骨成形術(shù)后骨吸收并發(fā)癥的效果及機制方面未見(jiàn)報告,本文旨在分析體外培養GFP裸小鼠顱骨細胞的表形,為治療顱骨吸收準備工具細胞奠定基礎。

　　方法 取生后3d的GFP裸小鼠,在無(wú)菌條件下解剖雙側頂骨,連同骨膜,將顱骨剪成 1 mm2左右的小片,置于含有胎牛血清的1640培養基中,在5% CO2培養箱中作短期傳代培養,收集從骨片上長(cháng)出的細胞作相關(guān)檢測。

　　結果 對原代(P0)和繼代(P1、P2)細胞觀(guān)察表明,在60 mm皿底長(cháng)滿(mǎn) 90%的傳代時(shí)間約6~ 8d,抽樣細胞計數約2. 3×106 ~ 2. 5×106個(gè)/皿,形態(tài)以纖維形為 主,也有星形和樹(shù)突狀;在熒光顯微鏡下所有細胞全部發(fā)綠色熒光,形態(tài)與白光鏡下一致;標志蛋白檢測表明,在整個(gè)細胞群中同時(shí)存在 BMP-6+的成骨祖細胞和CD206+ 、CD68+的巨噬細胞。

　　結論 基于顱骨再生,除了成骨祖細胞作為起始細胞,還必須有巨噬細胞參與維持環(huán)境穩態(tài),培養成功的P0,P1和P2三代細胞因同時(shí)滿(mǎn)足這個(gè)需要,有望作為工具細胞進(jìn)一步用于顱骨再生的研究。