目的 通過(guò)對比小鼠孵化囊胚以及其休眠胚胎程序化冷凍并解凍處理前后 Mgst1 基因的相對表達情況,以及 Mgst1 蛋白的差異表達分布情況,分析 Mgst1 基因在小鼠胚胎程序化冷凍過(guò)程中發(fā)揮的作用,為胚胎抗凍機理研究提供新的理論基礎。
方法 使用激光共聚焦掃描顯微鏡采集 Mgst1 蛋白在胚胎中表達分布的免疫熒光圖像;使用 qRT-PCR 技術(shù)鑒定 Mgst1 基因在胚胎中的相對表達量。
結果 通過(guò)免疫熒光圖像發(fā)現,Mgst1 蛋白在小鼠冷凍前后的孵化囊胚與休眠胚胎中均有表達;通過(guò) qRT-PCR 發(fā)現,冷凍前的孵化囊胚與休眠胚胎的 Mgst1 基 因相對表達無(wú)顯著(zhù)差異(P > 0. 05);冷凍后的孵化囊胚 Mgst1 基因相對表達量較冷凍之前顯著(zhù)上調(P < 0. 05);冷 凍后的休眠胚胎 Mgst1 基因相對表達量較冷凍之前極顯著(zhù)上調(P < 0. 01);冷凍后的休眠胚胎 Mgst1 基因相對表達量較冷凍后的孵化囊胚顯著(zhù)上調(P < 0. 05)。
結論 Mgst1 基因可能在小鼠胚胎抗凍機制中發(fā)揮著(zhù)重要的正調 控作用。