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【動(dòng)物實(shí)驗外包服務(wù)】-基于OPG-RANK-RANKL系統研究飼糧不同鈣水平對生長(cháng)期WHBE兔骨代謝的影響

  目的: 利用護骨素-核因子κB受體活化子-核因子κB受體活化子配體(OPG-RANK-RANKL)系統,探討飼糧不同鈣水平對生長(cháng)期WHBE兔骨代謝影響。

  方法: 選擇21只雄性斷奶WHBE兔,隨機分為3組(I、Ⅱ、Ⅲ組),分別飼以鈣水平為0.95%,1.10%和1.30%,其他營(yíng)養水平基本一致的飼糧。實(shí)驗期42 d。實(shí)驗結束,測定兔血清鈣(Ca)、甲狀旁腺素(PTH)和骨源性堿性酶(BALP)含量;分別運用熒光定量PCR法和免疫組織化學(xué)法對WHBE兔骨組織進(jìn)行OPG-RANK-RANKL的基因轉錄和蛋白表達分析。最后以RANKL/OPG比值為指標,評估WHBE兔骨代謝與飼糧鈣水平間的相關(guān)性。

  結果: 實(shí)驗結果表明,I、Ⅱ、Ⅲ組在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差異無(wú)顯著(zhù)性(P>0.05)。WHBE兔骨組織RANKL mRNA表達水平和RANKL/OPG mRNA比值均以Ⅱ組最低,與I、Ⅲ組差異有顯著(zhù)性(P<0.05)。鈣水平對WHBE兔骨組織OPG-RANK-RANKL蛋白表達影響顯著(zhù)(P<0.01),Ⅱ組和Ⅲ組OPG蛋白表達陽(yáng)性指數均極顯著(zhù)高于I組(P<0.01);而Ⅱ組兔骨組織RANK蛋白表達陽(yáng)性指數則極顯著(zhù)低于I組和Ⅲ組(P<0.01),RANKL/OPG的蛋白表達陽(yáng)性指數比值以Ⅱ組最低,與I組差異有顯著(zhù)性(P<0.01)。此外,WHBE兔骨組織RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表達陽(yáng)性指數比值均與飼糧鈣水平間存在顯著(zhù)的二次曲線(xiàn)相關(guān)(R2=0.4068,0.8433,P<0.05,P<0.001)。

  結論: 生長(cháng)期WHBE兔的骨代謝與飼糧鈣水平間呈顯著(zhù)相關(guān)性,當飼糧鈣含量為1.10%時(shí),生長(cháng)期WHBE兔可獲得較理想的骨代謝水平。

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