目的:探討IL-27及其受體(WSX-1)對TGF-β1誘導的小鼠肺成纖維細胞增殖、轉化及膠原合成作用。
方法:構建IL-27R/pCDNA3.1 過(guò)表達載體。實(shí)驗分為6 個(gè)組:正常組,TGF-β1 組,IL-27 組,IL-27 受體組,IL-27+IL-27 受體組,TGF-β1+IL-27+IL-27 受體組。光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察細胞的生長(cháng)狀況,用MTT檢測各處理組對肺成纖維細胞增殖的影響。RT-PCR 和Westernblotting 檢測肌成纖維細胞標志物a-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型膠原的表達,并用免疫熒光檢測a-SMA蛋白的定位及表達情況。
結果:(1)IL-27和IL-27R都可以抑制肺成纖維細胞增殖;(2)TGF-β1促進(jìn)肺成纖維細胞表達α-SMA增加,并促進(jìn)肺成纖維細胞Ⅰ和Ⅲ型膠原合成;(3)IL-27及其受體可以抑制肺成纖維細胞α-SMA的表達,并減少肺成纖維細胞I和III型膠原的合成;(4)IL-27/IL-27R共同作用時(shí),對肺成纖維細胞增殖轉化沒(méi)有影響。
結論:IL-27或IL-27受體可以抑制TGF-β1誘導的小鼠肺纖維化細胞增殖、轉化和膠原的合成作用,但是IL-27與IL-27受體共同存在的情況下卻不能發(fā)揮抑制作用,這可能是由于外源性的IL-27與IL-27受體的中和作用不能激活細胞相關(guān)信號。