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【動(dòng)物實(shí)驗外包服務(wù)】-小鼠腦脊髓炎病毒自然感染調查以及人工感染小鼠試驗

  目的: 了解小鼠腦脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情況,探究人工感染TMEV小鼠體內各臟器組織中病毒分布及血清抗體變化。

  方法: 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和熒光定量RT-PCR(qRT-PCR)檢測方法對2010年~2015年廣東地區采集的SPF級小鼠、開(kāi)放環(huán)境飼養的小鼠以及野生褐家鼠臨床樣本進(jìn)行TMEV檢測。36只ICR小鼠經(jīng)腦內接種TMEV BeAn病毒,每天觀(guān)察動(dòng)物的臨床癥狀,在接種第0、3、7、10、17、21、31、39、46天每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別對3只動(dòng)物安樂(lè )死,剖檢并取血清和組織臟器樣本進(jìn)行TMEV檢測。

  結果: SPF級小鼠TMEV抗體陽(yáng)性率為5.29%(n=2834),核酸陽(yáng)性率為27.27%(n=457);開(kāi)放環(huán)境飼養的小鼠的抗體和核酸陽(yáng)性率分別為71.95%(n=82)和53.66%(n=82);野生褐家鼠中核酸陽(yáng)性率為25.93%(n=27)。TMEV陽(yáng)性小鼠中僅有兩只小鼠表現有明顯的臨床癥狀。盲腸內容物、糞便和腦是qRT-PCR檢測的最佳選擇樣本。ICR小鼠腦內接種TMEV BeAn病毒后第3 d可在腦、心臟、肝臟、肺臟和胃中檢測到病毒核酸,脾臟、腎臟和盲腸中未檢測到病毒核酸。肝臟、心臟、肺臟和胃中的病毒在接種后第10天已完全清除,腦中的病毒一直持續存在到第46天試驗結束。小鼠感染后第7天可以檢測到抗體,隨后抗體水平逐漸升高,接種后17 d抗體陽(yáng)性率達100%,并一直到46 d都可以維持較高的抗體水平。人工感染小鼠呈隱性感染,臨床上并未表現明顯癥狀和眼觀(guān)病理變化。

  結論: 廣東地區實(shí)驗小鼠和野生褐家鼠均存在TMEV感染,且感染率較高。小鼠接種TMEV BeAn毒株后呈隱性感染,感染小鼠第7天可以產(chǎn)生抗體且持續存在。病毒在感染小鼠肝臟、心臟、肺臟和胃中短時(shí)間存在,而在腦中長(cháng)期存在。qRT-PCR與ELISA兩種檢測方法具有較好的一致性,qRT-PCR檢測方法可作為實(shí)驗動(dòng)物國家標準的有力補充。

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