1. 組織切片用PBS浸潤，復溫20分鐘。

2. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內源性過(guò)氧化物酶封閉液，室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗；

3. 滴加正常山羊血清封閉液，室溫30分鐘，甩去多余液體；

4. 滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃過(guò)夜），然后PBS充分淋洗；

5. 滴加兔/鼠二抗工作液，室溫孵育1h，PBS充分淋洗；

6. DAB顯色5-10分鐘，在顯微鏡下掌握染色程度 ；

7. PBS或自來(lái)水沖洗1分鐘 ；

8. 蘇木精復染3分鐘，鹽酸酒精分化,反藍；

9. 自來(lái)水沖洗1分鐘 脫水、透明、封片、鏡檢。