平板克隆形成試驗方法簡(jiǎn)單，適用于貼壁生長(cháng)的細胞。適宜底物為玻璃的、塑料瓶皿。試驗成功的關(guān)鍵是細胞懸液的制備和接種密度。細胞一定要分散得好，不能有細胞團，接種密度不能過(guò)大。

實(shí)驗方法：

       取對數生長(cháng)期的單層培養的XXX細胞，用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個(gè)細胞，把細胞懸浮在10%胎牛血清的RPMI1640培養液中備用。將細胞懸液作梯度倍數稀釋?zhuān)赃m當的細胞密度(根據增殖能力)接種于培養皿中。一般分每皿50、100、200個(gè)細胞的梯度密度分別接種含10mL 37℃預溫培養液的皿中，并輕輕轉動(dòng)，使細胞分散均勻。置37℃ 5%CO₂及飽和濕度的環(huán)境下，靜置培養2～3周。當培養皿中出現肉眼可見(jiàn)的克隆時(shí)，終止培養。棄去上清液，用PBS小心浸洗2次。加純甲醇或1:3醋酸/甲醇5mL，固定15min。然后去固定液，加適量Giemsa應用染色液染10～30min，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥。將平皿倒置并疊加一張帶網(wǎng)格的透明膠片，用肉眼直接計數克隆，或在顯微鏡(低倍鏡)計數大于50個(gè)細胞的克隆數。最后計算克隆形成率?？寺⌒纬陕?克隆數/接種細胞數×100%。