細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。用于研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中。
實(shí)驗方法:
轉染試劑的準備:將400μL去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。震蕩后將試劑放在-20℃保存,使用前還需震蕩。選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA質(zhì)量)來(lái)轉染細胞。在一個(gè)轉染管中加入合適體積的無(wú)血清培養基。加入合適質(zhì)量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。將混合液在室溫放置10―15 min。吸去培養板中的培養基,用PBS或者無(wú)血清培養基清洗一次。加入混合液,將XXX細胞放回培養箱中培養一個(gè)小時(shí)。到時(shí)后,根據細胞種類(lèi)決定是否移除混合液,之后加入完全培養基繼續培養24-48小時(shí)。