背景知識：

 細胞轉染技術(shù)是指將外源分子如DNA、RNA等導入整合細胞的技術(shù)。隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究極影功能、調控極影表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中，其應用越來(lái)越廣泛。影響轉染效率的因素有細胞株本身的特性和活性、細胞培養條件、轉染的DNA或RNA的質(zhì)量、轉染方法、轉染試劑的選擇等。

 常規轉染技術(shù)可分為兩大類(lèi)，一類(lèi)是瞬間轉染，二是穩定轉染。瞬時(shí)轉染是外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細胞中科存在多個(gè)拷貝數，產(chǎn)生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用于啟動(dòng)子和其他調控元件的分析。一般來(lái)說(shuō)，超螺旋質(zhì)粒DNA轉染效率較高，在轉染后24h~72h內分析結果，常常用到一些報告系統如熒光蛋白、β-半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測。穩定轉染是指外源DNA既可以整合到宿主細胞染色體上，也可能作為一種游離體存在。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約萬(wàn)分之一轉染細胞能整合，通常需要一些選擇性標記，如APH、HPH、TK等反復篩選，得到穩定轉染的同源細胞系。