實(shí)驗方法原理   先用組織學(xué)完整的新鮮人肝癌組織接種于裸鼠皮下，形成皮下移植瘤，然后用此移植瘤組織再接種于裸鼠肝內，建立肝原位移植瘤模型（間接肝原位移植瘤模型），并將其與直接肝原位移植瘤模型、皮下移植瘤模型和腹腔內移植瘤模型作比較。

實(shí)驗材料   NC裸鼠Balb c裸鼠

試劑、試劑盒  肝癌外科手術(shù)切除標本Hanks液戊巴比妥鈉甲醛石蠟

儀器、耗材   針頭光學(xué)顯微鏡手術(shù)刀剪刀紗布消毒液口罩

實(shí)驗步驟

一、間接肝原位移植瘤模型的制備　

      1.  用新鮮的肝癌外科手術(shù)切除標本（來(lái)自長(cháng)海醫院，患者為1名47歲男性，病理診斷：肝左葉肝細胞癌，粗梁型，Ⅱ級），在Hanks液中，去除壞死組織和非癌組織后切成1～2 mm3小塊。

      2.  取2塊瘤組織，在離體40 min內用粗針頭植入裸鼠腰背部皮下，待皮下移植瘤長(cháng)到直徑約1 cm時(shí)切取腫瘤，在Hanks液中，去除壞死組織后切成1～2 mm3小塊，裸鼠用戊巴比妥鈉腹腔麻醉后，行左上腹橫切口，暴露肝臟。

      3.  取上述2塊瘤組織，在離體40 min內用粗針頭植入裸鼠肝右葉深部實(shí)質(zhì)內，全層關(guān)腹。

二、直接肝原位移植瘤模型的制備　

      1.  同一例新鮮肝癌手術(shù)切除標本，處理方法同皮下移植，裸鼠處理同間接肝原位移植，取2塊瘤組織，在離體40 min內用粗針頭直接植入裸鼠肝右葉深部實(shí)質(zhì)內。

      2.  皮下移植瘤模型和腹腔內移植瘤模型的制備。

三、病理檢查和相關(guān)指標檢測

      1.  解剖和組織學(xué)檢查　

      （1）所有裸鼠接種后，分組分籠飼養，自由進(jìn)食，每天觀(guān)察1～2次。

      （2）當裸鼠處于全身衰竭狀態(tài)時(shí)處死并作大體解剖，對接種瘤和轉移瘤分別進(jìn)行觀(guān)察、測量，記錄腫瘤侵襲和轉移情況，重要器官（主要為肝和肺）經(jīng)10%中性甲醛固定后，常規石蠟制片，光學(xué)顯微鏡檢查。

      2.  周?chē)滋サ鞍?/span>(AFP)檢測，處死前，均采用摘眼球采血的方法獲得血液，用生化法檢測AFP的分泌量。

      3.  瘤細胞DNA含量分析，留取部分移植瘤標本采用流式細胞術(shù)進(jìn)行DNA含量分析。

     （本文轉載丁香園）