(1)復制方法
1)氯仿引起的小鼠心室顫動(dòng)
體重25~30g以上小鼠,將小鼠放入含有3~4ml氯仿棉球的倒置600ml燒杯內(以后每換一只小白鼠加入1ml氯仿),至呼吸停止立即取出剖開(kāi)胸腔,肉眼檢查心室顫動(dòng)發(fā)生率。
氯仿引起心室顫動(dòng)發(fā)生率如下:出生3周左右體重18~22g小鼠為40%~60%;生后4~5周體重25~30g為80%;生后6~8周體重36~45g為80%~90%,甚至100%。因此每批動(dòng)物在實(shí)驗前應預篩,心室顫動(dòng)發(fā)生在80%以上的為合格動(dòng)物。
2)氯仿一腎上腺素引起心律失常法(Arrahythmia induced by chloroform-adrenaline)
取實(shí)驗兔仰臥位固定于手術(shù)臺上,固定其頭部,將電極針刺入皮下與心電圖機相連。用麻醉口罩罩住口鼻部,將浸有氯仿的棉花放在麻醉口罩上,讓兔慢慢吸入(或將氯仿慢慢滴在麻醉口罩上)進(jìn)行吸入麻醉。當角膜反射剛消失時(shí)(此時(shí)約進(jìn)入麻醉的第三期第一級)。記錄正常心電圖Ⅱ導聯(lián)后。此時(shí)絕大部分動(dòng)物心電圖正常,少數動(dòng)物出現室性早搏或結性心律。立即停給氯仿,給予受試藥物,5min后描記Ⅱ導聯(lián)心電圖,立即由耳緣靜脈快速注入0.01%腎上腺素溶液0.5ml/kg,注射完畢立即描記心電圖并用示波器連續監視。1min內每隔15s記錄1次,以后每分鐘記錄一次,直至20min,必要時(shí)隨時(shí)描記。靜脈快速注入腎上腺素可迅速出現一源性或多源性室性早搏、陣發(fā)性心動(dòng)過(guò)速,甚至出現心室顫動(dòng)。持續3~7min,大部分動(dòng)物于10min內完全恢復竇性心律。少數動(dòng)物因血壓升高反射性地興奮迷走神經(jīng)而心律減慢,可出現結性或室性逸搏,漸變?yōu)榻Y性或室性心律,5min左右恢復竇性心律。待心律失?;謴驼:?,間隙30~60min可再次給予氯仿一腎上腺素。同一兔重復3次,以觀(guān)察藥物作用持續時(shí)間。氯仿麻醉劑量對實(shí)驗結果影響很大,故麻醉深度盡量一致。注射腎上腺素速度要快,心律失常持續時(shí)間短,需及時(shí)觀(guān)察,并精確計算心律失常發(fā)生時(shí)間和持續時(shí)間。實(shí)驗可分為對照組和給藥組。給藥組可以實(shí)驗前或注射腎上腺素前用藥,然后再由靜脈注射腎上腺素,比較兩組發(fā)生心律失常時(shí)間和持續時(shí)間。也可用以下方法進(jìn)行藥效評價(jià):給藥后完全不出現心律失常為特效;若心律失常比對照組減少80%以上者為顯效;減少50%以上者為有效;減少50%以下者為無(wú)效。
3)腎上腺素引起心律失常法(Arrahythmia induced by adrenaline)
6~8周齡、體重200g左右SD大鼠。將大鼠用新鮮配制的20%烏拉坦,按1.2g/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射麻醉,仰臥固定,切開(kāi)腹股溝處皮膚,分離股靜脈,用5號頭皮針穿刺并固定,連接恒速輸液泵,以供靜脈恒速給予腎上腺素用。把針電極刺入大鼠四肢皮下,并與心電圖機及心電示波器相連。手術(shù)完畢記錄正常Ⅱ導心電圖。然后靜脈注射0.9%氯化鈉溶液1ml,1min注完。分別在0, 1, 2, 3, 4, 5min記錄一段心電圖,發(fā)現有心律不齊者淘汰。篩選合格的大鼠恒速靜脈注射濃度為0.0001腎上腺素40μg/kg體重,速度為1ml/min。記錄給藥時(shí)間,密切觀(guān)察示波器上動(dòng)物心電變化,注射完畢立即描記心電圖,連續描記30s,隨后每隔10s記錄一次,直至心電完全恢復正常。記錄心律失常的起始和恢復時(shí)間。待完全恢復正常后,隔10~20min可重復靜注腎上腺素,記錄同前。觀(guān)察指標有心律失常的起始時(shí)間、心律失?;謴蜁r(shí)間和室性早搏出現的次數。
(2)模型特點(diǎn)
兔氯仿一腎上腺素引起心律失常模型的動(dòng)物不會(huì )發(fā)生死亡,動(dòng)物在前一次實(shí)驗后間隔1d以上還可以進(jìn)行實(shí)驗,因此可以對同一個(gè)動(dòng)物采取自身對照的實(shí)驗方法,減少了動(dòng)物個(gè)體差異帶來(lái)的實(shí)驗誤差。
而篩選抗心律失常藥物時(shí),選用小動(dòng)物具有優(yōu)勢,可進(jìn)行大批量的篩選工作。且方法簡(jiǎn)單,不需要特殊的儀器。且氯仿誘發(fā)的室顫發(fā)生率高較易觀(guān)察。
單用腎上腺素誘發(fā)的大鼠心律失常模型,方法簡(jiǎn)便、反應快、維持時(shí)間短、可反復多次重復、心律失常程度可用增減腎上腺素給藥劑量的辦法進(jìn)行控制,可以進(jìn)行自身對照,不易產(chǎn)生快速耐受現象。
(3)比較醫學(xué) 大劑量的腎上腺素可直接興奮β受體,使心臟自律性、傳導性、應激性等提高而導致心律失常(室性早搏、室性心動(dòng)過(guò)速,甚至心室顫動(dòng)),同時(shí)由于大量的腎上腺素快速靜注入動(dòng)物體內,致血壓升高,反射性地興奮迷走神經(jīng),而高度減慢心率,出現結性或室性逸搏,漸變?yōu)榻Y性或室性心律,而形成室性早搏。而氯仿與腎上腺素合用更增加對心臟的毒性。