(1)復制方法  體重為120～150g的4周齡大鼠，每日上午定時(shí)灌胃給予0～4℃生理鹽水2ml，1次/d，連續14d。14d后停止灌胃，按常規飼養。28d時(shí)，收集冰水灌胃后3h內及3～24h間的大便，計大便粒數，電子天平稱(chēng)其濕重，微波烘烤8min后稱(chēng)其干重，計算大便含水量百分比。含水量百分比=[(濕重－干重)/濕重]×100％。然后，將大鼠放入到可觀(guān)察到腹部收縮反射的鼠固定器內，將帶有氣囊、外涂石蠟油的導尿管經(jīng)肛門(mén)插入，氣囊末端距肛門(mén)1cm，用4號手術(shù)縫線(xiàn)在導尿管平肛門(mén)外緣水平打結固定于鼠尾，相隔2cm處同樣方法固定。待15min后大鼠適應環(huán)境呈安靜狀態(tài)時(shí)，經(jīng)導尿管外口向球囊內注入26～28℃生理鹽水，記錄引起大鼠腹部收縮反射的最小注水量。重復注水擴張3次，每次間隔15min，以3次擴張測得的最小容量閾值的均值為該鼠直腸擴張引起腹部收縮反射的最小容量閾值。測定閾值的次日，分別測定注水量為1.0ml、1.5ml、2.0ml時(shí)3min內大鼠腹部收縮反射的次數，每次間隔30min，用引起大鼠腹部收縮反射的最小容量閾值和直腸內球囊不同容量擴張時(shí)3min內大鼠腹部收縮反射的次數評價(jià)大鼠對直腸內擴張刺激的敏感性。在直腸內球囊擴張結束后1h，將動(dòng)物處死，分別取其回盲部、距肛門(mén)3cm處的結腸各0.5cm，生理鹽水沖洗。10％甲醛溶液固定，常規石蠟包埋切片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察其組織形態(tài)學(xué)變化，計數回盲部及結腸肥大細胞(MC)數目，同時(shí)，應用1：100稀釋的兔抗5-羥色胺(5-HT)、P物質(zhì)(SP)、血管活性腸肽(VIP)、γ-氨基丁酸(GABA)、乙酰膽堿酯酶(AchE)、酪氨酸羥化酶(TH)抗體，按SABC免疫組化法進(jìn)行標記，采用計算機病理圖像分析系統，對切片中各抗體呈陽(yáng)性反應的面積、不透光率密度(OD)進(jìn)行半定量分析。

　　(2)模型特點(diǎn)  造模開(kāi)始后的1～14d，冰水灌胃后3h內大便粒數和含水量均呈顯著(zhù)增多，表現為大便增加，大便明顯變軟，變稀，部分可出現糊狀便，而3～24h時(shí)，大便逐漸由軟便、糊狀便轉為較干燥的成形便，大便粒數和含水量逐漸減少；造模開(kāi)始后的15～28d(停止灌胃冰水)，對應冰水灌胃時(shí)間段的3h內大便粒數和含水量與正常動(dòng)物無(wú)明顯異樣，而3～24h時(shí)，大便不僅轉為較干燥的成形便，并隨實(shí)驗天數的增加，伴隨大便粒數逐漸減少的同時(shí)出現大便性狀逐漸干硬。腸道敏感性檢測結果顯示，模型動(dòng)物直腸內球囊體積1.0ml低容量擴張時(shí)，3min內腹部收縮反射次數明顯降低，而1.5ml、2.0ml高容量擴張時(shí)，腹部收縮反射次數無(wú)明顯變化。此外，模型動(dòng)物胃、回盲部及結腸組織形態(tài)學(xué)檢查未見(jiàn)有明顯的異常病理改變，但在其回盲部、結腸肌層中，5-HT陽(yáng)性細胞面積(即細胞數目)增多，SP表達的不透光率密度增高，VIP表達的陽(yáng)性面積、不透光率密度均增大； GABA表達的不透光率密度降低，AchE、TH表達的陽(yáng)性面積、不透光率密度無(wú)明顯變化。

　　(3)比較醫學(xué)  IBS患者大多數對某種或多種食物不耐受，進(jìn)食后可誘發(fā)和加重癥狀。飲食性IBS可能與患者對應激飲食的高敏感性，食后產(chǎn)生腹脹、氣脹及過(guò)敏有關(guān)。冷飲刺激是人類(lèi)IBS比較公認的一種危險因素。采用冰水灌胃可誘發(fā)大鼠IBS模型。本方法通過(guò)連續14d的冰水灌胃，誘發(fā)大鼠大便粒數減少和含水量下降，并且此趨勢在停止灌胃刺激后仍能持續存在，保持穩定。類(lèi)似于便秘型IBS的腸道運動(dòng)異常是本模型的最大特點(diǎn)。在冰水灌胃后，大鼠腹部收縮反射的最小容量閾值有增高趨勢，在低容量(1m1)擴張時(shí)其腹部收縮反射次數明顯少于正常對照組，表現為對直腸內球囊擴張刺激的敏感性降低，這與便秘型IBS患者初始感覺(jué)閾值、疼痛閾值和排便閾值明顯高于正常人的臨床狀況相一致。本IBS模型不僅表現有腸道運動(dòng)、敏感性改變，而且存在回盲部、結腸肥大細胞(MC)及5-HT陽(yáng)性?xún)确置诩毎黠@增多，而MC和5-HT的釋放過(guò)多及相應受體的過(guò)分活化均是腸道致敏的外周機制。