1  a-萘基異硫氰酸模型

　　(1)復制方法  成年大鼠、豚鼠或家兔，一次性灌服旺a-萘基異硫氰酸(a-naphthyl-isothiocyanate, ANIT)100～200mg/kg體重，或腹腔注射ANIT 75mg/kg體重的劑量，可誘發(fā)急性肝內膽汁淤滯。若將ANIT以0.1％的比例混合在飼料中長(cháng)期喂飼動(dòng)物，可誘發(fā)持續性的膽管炎癥。造模畢，抽取膽汁和全血作膽汁和血清生化學(xué)檢查，摘取肝臟和膽囊作組織病理學(xué)檢查。

　　(2)模型特點(diǎn)  大劑量經(jīng)口或腹腔注射給予ANIT，模型動(dòng)物體重減輕，肝膽腫大，膽汁流量減少，數天后引發(fā)黃疸。膽汁和血清生化學(xué)檢查顯示，大鼠給予ANIT 24h時(shí).腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細胞介素-6(IL-6)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LDH)、γ-谷胺酰轉肽酶(GGT)及堿性磷酸酶(ALP)活性、血清總膽紅素(TBIL)、結合膽紅素(DBIL)、總膽酸(T-BA)、總膽固醇(TC)及脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)濃度均呈顯著(zhù)升高，48h后更甚，為24h時(shí)的1.1～3.7倍。組織病理學(xué)檢查顯示，模型豚鼠肝細胞呈不同程度的變性和壞死，匯管區小膽管和膽管細胞增生，小葉間膽管擴張，膽汁郁結，部分膽管上皮細胞顆粒變性和壞死，少數管腔中有泡沫狀膽栓或嗜堿性的結晶物沉積，后期匯管區結締組織呈不同程度的增生，呈現明顯的纖維化；膽囊表現為急性增生性炎癥，黏膜上皮細胞增生劇烈，杯狀細胞普遍增多，黏膜皺襞和黏膜下陷形成的隱窩豐富，固有層腺體增生，且為復管泡狀腺，有羅－阿氏竇形成。模型大鼠或模型家兔肝細胞有壞死、變性，肝竇有擴張，毛細血管淤膽明顯，匯管區有大量炎癥細胞(淋巴細胞和漿細胞)浸潤，膽管上皮細胞水腫，空泡變性多見(jiàn)，且易見(jiàn)固縮壞死。小劑量ANIT摻入飼料中長(cháng)期喂飼大鼠，可導致動(dòng)物肝細胞輕度損害，出現明顯的膽管炎癥和毛細血管增生，7周后呈現出膽汁性肝硬化改變。

　　(3)比較醫學(xué)  膽汁淤滯與膽汁排泌障礙密切相關(guān)。膽汁淤滯包括肝內膽管膽汁淤滯和肝外膽汁淤滯。肝內膽管膽汁淤滯指由于各種原因使肝細胞排泌膽汁障礙，以致肝內膽汁淤滯和血中膽汁成分增多，而無(wú)膽管阻塞者?，F代醫學(xué)證明，肝臟毛細膽管發(fā)生器質(zhì)性或功能性異常變化是導致膽汁通過(guò)障礙的重要原因。ANIT誘發(fā)動(dòng)物肝損的生物化學(xué)和病理形態(tài)學(xué)改變與人類(lèi)肝內膽汁淤滯病變十分相似，主要表現為肝細胞變性壞死，肝內膽管上皮細胞損傷，小葉間膽管周?chē)a(chǎn)生炎癥，從而造成膽汁通過(guò)障礙。通過(guò)對該模型動(dòng)物膽汁、血清生化和組織形態(tài)學(xué)指標的檢測，可以清晰地了解膽汁酸的代謝狀況(TBIL、DBIL、T-BA、TC及LPO)，膽汁淤滯所致細胞因子分泌紊亂的信息(TNF-a、IL-6)和肝細胞的受損程度(AST、ALT、LDH、GGT和ALP)，以及診斷肝臟或毛細膽管的病變特點(diǎn)(顯微鏡、電鏡和酶組化檢查)。由于該模型制作方法簡(jiǎn)便，病理和生化指標明確，且在動(dòng)物體上可以誘發(fā)黃疸，所以常作為篩選和評價(jià)保肝或退黃藥物活性的實(shí)驗動(dòng)物模型而被使用。

　　2 ?；鞘懰徕c模型

　　(1)復制方法  成年大鼠，麻醉剖腹，在總膽管插入聚乙烯管進(jìn)行膽汁引流，同時(shí)將?；鞘懰徕c(sodium ttaurolithochlate，TLC)以0.6/μmol/min的速度由股靜脈緩緩地注入動(dòng)物體內，共135/μmol/kg體重。在造模過(guò)程中，可監測膽汁流量的變化，造模完畢后，經(jīng)麻醉測模型大鼠膽汁流量，抽取膽汁作膽汁成分分析和膽汁黏度測定，并處死大鼠取其肝臟組織作組織病理學(xué)檢查。

　　(2)模型特點(diǎn)  在靜脈注入TLC后，動(dòng)物膽汁流量大大減少，膽汁黏度顯著(zhù)增加。電子顯微鏡下觀(guān)察，毛細膽管壁的變化明顯，膜的Na+－K+－ATP酶活性明顯降低，在膜的脂質(zhì)結構上可見(jiàn)膽固醇脂急劇升高。

　　(3)比較醫學(xué)  ?；鞘懰徕c模型具有明顯的肝內膽管膽汁淤滯的病理特征。實(shí)驗研究結果表明，?；鞘懰徕c能抑制毛細膽管膜上的Na+－K+－ATP酶的活性，膜的鈉泵效率和流動(dòng)性的降低以及毛細膽管的結構變化導致了膽汁分泌障礙。另外，由?；鞘懰徕c所形成的微團粗大，使膽汁黏度顯著(zhù)增加，這也是?；鞘懰徕c造成膽汁淤滯的原因。在人類(lèi)先天性膽管閉塞癥患兒的尿中，與石膽酸結構相近的羥基膽酸鹽往往升高。Byles患者中有一部分人的血液中，石膽酸鹽升高。本模型的特點(diǎn)與上述疾病的臨床表現相似。

　　3 肝外膽汁淤滯模型

　　(1)復制方法  成年動(dòng)物，麻醉剖腹，游離總膽管，并在靠近的位置結扎膽管，切除膽囊，關(guān)閉腹腔后造模術(shù)畢。次日或以后不同時(shí)間，采血制備血清進(jìn)行生化學(xué)檢查，剖腹摘取肝膽作組織病理學(xué)檢查。

　　(2)模型特點(diǎn)  大鼠的膽管被結扎后，肝臟和血清中的堿性磷酸酶(ALP)的活性急劇上升，引起高膽固醇血癥，甚至出現膽汁酸中毒。在從膽管被結扎的第二天起，周?chē)誓さ拿毮懝苊黠@增生，甚至出現膽汁性壞死現象。電子顯微鏡下，毛細膽管內腔擴張，微絨毛數減少，外胞漿肥厚，滑面小體和溶酶體增加。

　　(3)比較醫學(xué)  總膽管的結扎作為肝外膽管的完全閉塞性模型是十分有用的，手術(shù)操作較簡(jiǎn)便。但是，不同種屬的動(dòng)物體內膽汁酸含量有明顯的差異，模型制作中要注意對動(dòng)物的選擇。