腺病毒包裝
1 特點(diǎn)：
1.1 幾乎可以感染所有類(lèi)型的細胞。
1.2 可以獲得復制缺陷型（E1和E3缺失）的腺病毒。
1.3 病毒滴度高，產(chǎn)生病毒經(jīng)過(guò)濃縮后可以達到1012 PFU/mL，能有效地進(jìn)行增殖。
1.4 腺病毒載體感染宿主的范圍比較廣。
1.5 感染細胞時(shí)，不整合到染色體中，不存在激活致癌基因或插入突變等危險，生物安全性高。
2原理：
腺病毒（Adenovirus，Ad）是一種無(wú)包膜的線(xiàn)狀雙鏈DNA病毒，其復制不依賴(lài)于宿主細胞的分裂。有近50個(gè)血清型，大多數Ad載體都是基于血清型2和5，通過(guò)轉基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的復制能力。這些重組病毒僅在高水平表達E1和E3基因的細胞中復制，因此是一種適用于治療的高效控制系統。
3 腺病毒包裝簡(jiǎn)要流程
3.1 含有目的基因的腺病毒穿梭載體的構建和質(zhì)粒純化提取。
注：客戶(hù)也可以提供構建好的重組腺病毒穿梭載體。
3.2 穿梭載體與腺病毒骨架質(zhì)粒重組及鑒定。
3.3 重組腺病毒質(zhì)粒的酶切線(xiàn)性化。
3.3 線(xiàn)性化的重組腺病毒質(zhì)粒轉染包裝細胞，收獲細胞以制備病毒粗提液。
3.4 腺病毒擴增并純化。
3.5 分裝，- 80 oC保存。
3.6 滴度測定及無(wú)菌檢測。
