1、組織取材應規范

用于冷凍切片的組織 ,大小要合適 , 厚薄要均勻。組織塊的大小一般為 115 cm x115 cmx012 cm ～115 cm x115 cm x013 cm [ 6 ] 。組織過(guò)大 ,切片的阻力過(guò)大 ,易產(chǎn)生皺折 ,刀痕 ,造成組織崩解 ,增加切片難度 ,影響病理診斷。反之 ,組織過(guò)小 ,破碎 ,則不宜將組織包埋在同一個(gè)水平面 ,影響切片操作 ,造成漏診或誤診。

2、組織標識要明確

重點(diǎn)部位的組織應該標識明確 ,明確組織的包埋方向?？梢赡[瘤的范圍 ,淋巴結和帶有包膜的組織 ,需要將整個(gè)切面暴露且含有整個(gè)包膜的存在。對于條索狀的組織要確定是否為切緣。

3、組織結構要知曉

纖維結締組織豐富的組織 ,如果逆著(zhù)纖維紋理切片 ,容易崩裂。脆硬的組織應該主張薄切。腦組織易脫片且含水分較多 ,需要提前用濾紙拭干并準備防脫涂膠片。

4、組織定位要規范 　

囊壁類(lèi)組織需要豎立包埋 ,且切面含有整個(gè)組織面的全層 ,一般可以將幾條立埋的囊壁排列在一起卷成“U 字型”,可以幫助囊壁更好保持側立。組織大小差異較大的 ,應該先包埋大塊組織 ,并依靠大塊組織擺放小塊組織 ,這樣可以最快的切到大小不同組織的最大面。細小的組織在包埋時(shí) ,需要將底部墊高 ,防止因為切不到造成切片機損壞。包埋時(shí)可以選擇先制作一個(gè) OCT凍托 ,在 OCT 接近凝固時(shí) ,將組織快速“種植”包埋進(jìn)半凝的OCT中。腦組織和脂肪組織應特殊對待。

5、切片固定要及時(shí) 　

固定及時(shí)是冷凍切片制作的第一要 素 ,固定的最佳時(shí)機應在切片后馬上將裱好組織切片的載玻 片放進(jìn)固定液中固定。固定液要保持新鮮 ,經(jīng)常更換。

6、固定選擇要準確 　

甲醇固定時(shí)間快 ,細胞收縮小 ,對細胞核和抗原保存較好。缺點(diǎn)是揮發(fā)性強 ,毒性較大。95%乙醇是兼有脫水作用的固定液 ,滲透力弱 ,固定速度慢 ,對糖原蛋白固定效果較好 ,能溶解脂類(lèi) ,易造成組織細胞收縮。丙酮能使蛋白沉淀 ,滲透力強 ,細胞收縮嚴重 ,對細胞核固定相對較強 ,對酶的固定較好 ,作用相當于乙醇 ,對糖原沒(méi)有固定作用。AF液是乙醇和甲醛液混合的固定液 ,兼有乙醇和甲醛液的作用 ,固定的同時(shí)有脫水的作用。AAF液與 AF液固 定液作用相似 ,固定同時(shí)有脫水作用。因其中多了冰醋酸成分 ,故能迅速固定染色質(zhì) ,且固定效果均勻 ,還能抵消一部分乙醇對組織的收縮作用。