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免疫學(xué)檢測

    免疫學(xué)檢測是根據抗原、抗體反應的原理,利用已知的抗原檢測未知的抗體或利用已知的抗體檢測未知的抗原,可以定性、定位和定量地檢測某一特異蛋白。金開(kāi)瑞可提供蛋白印跡(WB)、免疫組化(IHC)、免疫沉淀(IP)、免疫熒光(IF)、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)、染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)等。


Western blot(WB)——蛋白印跡


       WB技術(shù)利用抗體與組織或細胞樣品中特定蛋白的特異性結合作用,根據顯色條帶的位置和強弱實(shí)現蛋白鑒定和表達分析。其具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,選用合適的內參抗體能夠校正蛋白定量和上樣過(guò)程中的誤差,通過(guò)灰度計量可以定性或定量分析不同樣品中蛋白表達情況。
 

Immunohistochemistry(IHC)——免疫組化 


       IHC技術(shù)利用特異性抗體與組織細胞原位抗原結合,通過(guò)化學(xué)反應使標記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細胞內抗原,對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。其特點(diǎn)在于切片制作過(guò)程中保持組織、細胞的原有結構及形態(tài),因此可以反應目標抗原在組織結構中的分布以及亞細胞定位。組織細胞定位往往是生理功能發(fā)揮或變化的體現,是研究中常常關(guān)注的因素。
 

Immunoprecipitation(IP)——免疫沉淀


       IP技術(shù)是利用抗原抗體特異性反應純化富集樣品中目的蛋白的一種方法。通常使目標蛋白同抗體-protein A/G形成免疫復合物沉淀而得以收集,然后通過(guò)western blot檢測目的蛋白。
Co-IP技術(shù)是將樣品中同抗體靶蛋白相互作用的蛋白一同隨免疫復合物沉淀,檢測兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內存在相互作用,確定一種蛋白在體內的相互作用蛋白。
 

Immunofluorescence(IF)——免疫熒光


       IF技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎上建立起來(lái)的一項技術(shù),將抗體分子與一些示蹤標記結合,利用抗原抗體反應進(jìn)行組織或細胞內抗原物質(zhì)的定位和定量。
 

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA)——酶聯(lián)免疫吸附測定


        ELISA技術(shù)以免疫學(xué)反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗技術(shù)。不僅可以用來(lái)測定抗體,而且也可用于測定樣品中的抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
 

Chromatin immunoprecipitation assay( ChIP)—— 染色質(zhì)免疫沉淀


        ChIP技術(shù)是將樣品中同抗體靶蛋白相互作用的DNA隨免疫復合物沉淀,是研究體內蛋白質(zhì)與DNA相互作用的有力工具,可以檢測體內反式因子與DNA的動(dòng)態(tài)作用,還可以用來(lái)研究組蛋白的各種共價(jià)修飾以及轉錄因子與基因表達的關(guān)系。 


       (本文轉載丁香通)

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