1.磷酸鈣共沉淀

原理：該法可用于瞬時(shí)或穩定轉染。然而因其對pH、溫度和緩沖液鹽濃度的微小變化十分敏感，所得結果容易出現差異，且對許多類(lèi)型的細胞培養物(尤其是原代細胞)具有細胞毒性，轉染效率較差。

實(shí)驗步驟：將核酸與氯化鈣在磷酸鹽緩沖液中混合，同時(shí)控制好pH、溫度等條件 → 室溫孵育，生成濃縮DNA的極小不溶性顆粒沉淀 → 將顆粒型沉淀分散到細胞中，促進(jìn)DNA粘附在細胞表面 → 共沉淀通過(guò)內吞作用進(jìn)入胞漿 → 分析細胞瞬時(shí)基因表達或者選擇穩定性傳染。

2.人工脂質(zhì)體法 

原理：帶正電的脂質(zhì)體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物，進(jìn)而可被細胞內吞穩定轉染/瞬時(shí)性轉染。這種方法幾乎適用于所有細胞，轉染效率高、重復型好，但轉染時(shí)需要去除血清，轉染效果隨細胞類(lèi)型變化大。

實(shí)驗步驟：在單獨試管中分別稀釋核酸及轉染試劑→ 脂質(zhì)體與核酸的磷酸骨架結合，形成復合物 → 脂質(zhì)體上的正電荷有助于復合物與細胞膜結合 → 復合物通過(guò)內吞作用進(jìn)入胞漿 → 分析細胞瞬時(shí)基因表達或沉默情況。

3.病毒轉染

原理：對于用脂質(zhì)體不能實(shí)現轉染的細胞，可以采用病毒轉染?？捎糜诘鞍踪|(zhì)過(guò)表達或抑制，是臨床研究中最常用的方法。它通過(guò)侵染宿主細胞將外源基因整合到染色體中，可用于難轉染細胞、原代細胞的穩定性轉染。

實(shí)驗步驟：通過(guò)基因克隆生成重組病毒→ 采用非病毒法轉染包裝細胞系，擴增并分離得到重組病毒顆?！兓⒌味ú《疽骸D導目的細胞（含有病毒特異性的受體）→去除培養物中的病毒，并加入新鮮培養基→分析細胞瞬時(shí)基因表達或沉默情況。

4.電穿孔法

原理：利用電脈沖在細胞膜上形成暫時(shí)的孔使核酸物質(zhì)能穿過(guò)孔進(jìn)入細胞。

實(shí)驗步驟：將細胞懸浮于點(diǎn)穿孔緩沖液中，制備細胞→ 在特定緩沖液存在的條件下嗎，對細胞施加合適的電脈沖 → 電脈沖在細胞膜上形成電勢差，形成臨時(shí)孔，使核酸進(jìn)入細胞 → 使細胞恢復生長(cháng)狀態(tài)，復蘇 → 分析細胞瞬時(shí)基因表達或沉默情況。