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細胞鋪板標準化操作

研究意義:細胞在培養瓶長(cháng)成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長(cháng),同時(shí)也將細胞數量擴大,須進(jìn)行傳代再培養。傳代鋪板培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時(shí)也是利用培養細胞進(jìn)行各種實(shí)驗的必經(jīng)過(guò)程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。


細胞鋪板       


貼壁細胞:當細胞的融合度達到90%以上時(shí),棄去培養液,PBS洗2次,加入胰蛋白酶消化3 min,加入含10%FBS的DMEM(RPMI-1640),將細胞吹打下來(lái)并吸取到10 mL離心管中,離心,棄上清,注意不要碰到管口,加入DMEM(RPMI-1640)完全培養基并接種到七個(gè)六孔板和96孔板中,置于37℃,5% CO2培養箱中繼續培養,并在六孔板和96孔板上標明細胞名稱(chēng)及日期。


懸浮細胞:離心,棄上清液,加新鮮培養基,分裝到六孔板或96孔板中。

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