目的:通過(guò)人工感染減蛋綜合征病毒(egg drop syndrome virus,EDSV),觀(guān)察病毒在不同品系小鼠體 內增殖情況以及動(dòng)態(tài)變化規律,為EDSV構建載體提供理論依據與數據支持?
方法:選取免疫系統正常的BALB/c 小鼠?T細胞免疫缺陷裸鼠(Nu)以及高度免疫缺陷小鼠(NSG)為研究對象,每品系32只,雌性,5~ 6周齡,經(jīng)腹腔 注射人工感染EDSV,分別于攻毒后1?3?5?7?14?21?28?35d采集血清,應用間接ELISA方法進(jìn)行抗體監測;選擇攻 毒后1?7?14?21?28d小鼠,采集心臟?肺?肝?脾?腎?小腸?子宮?氣管?食管?腦10種組織,應用熒光定量PCR相對 定量比較Ct法(△△CT)進(jìn)行各組織內病毒載量的檢測?
結果:BALB/c小鼠于攻毒后3d即可在血清內檢測到 抗體的表達,14d抗體水平達到最高,并一直維持至監測期內35d;Nu小鼠也可于攻毒后3d檢測到抗體,表達水 平較BALB/c小鼠有所降低,攻毒14d后,Nu小鼠血清中抗體水平出現下降,至35d抗體一直維持在較低的水平; NSG小鼠在整個(gè)監測過(guò)程中,抗體水平一直處于陰性狀態(tài)? 核酸相對定量結果顯示,BALB/c小鼠感染后1d,肝組 織中的病毒表達量最高,達到5.45個(gè)數量級,其次由高到低依次是脾?食管?子宮?小腸?肺?氣管?腎?心臟,腦組織 中病毒含量最低,隨感染時(shí)間的延長(cháng),各組織內病毒表達量較感染1d均有所下降,至攻毒后28d,肝?脾病毒表達 量依然維持著(zhù)較高的水平;Nu小鼠和NSG小鼠感染1d表現為脾中病毒表達量最高,分別為3.95和4.05個(gè)數量 級,其次為肝,攻毒28d,兩種小鼠體內各器官內仍可以檢出陽(yáng)性信號,肝?脾病毒表達量較高?
結論:EDSV可刺 激小鼠產(chǎn)生免疫應答,在免疫缺陷小鼠體內抗體水平表達量較低? 該病毒在小鼠體內有肝?脾等組織嗜性,為 EDSV開(kāi)發(fā)成為載體以及在實(shí)驗動(dòng)物模型上的進(jìn)一步研究與應用提供了參考數據?